評估線粒體功能狀態(tài)的基于細(xì)胞的檢測方法正在成為闡明線粒體活動(dòng)在藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡級聯(lián)和其他細(xì)胞和生化過程中的作用的有用工具。線粒體膜電位(MMP)的喪失往往與細(xì)胞凋亡的早期階段有關(guān)。MMP的崩潰與線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的打開相吻合，導(dǎo)致細(xì)胞色素C釋放到細(xì)胞質(zhì)中，這反過來又觸發(fā)了凋亡級聯(lián)中的其他下游事件。
線粒體膜電位檢測試劑盒——用一種陽離子染料測量線粒體膜電位，根據(jù)膜電位狀態(tài)發(fā)出綠色或橙色的熒光。在有能量的細(xì)胞(膜電位較高)中，染料在細(xì)胞質(zhì)中以綠色熒光單體存在，同時(shí)在線粒體中以橙色熒光聚集體的形式聚集。然而，在線粒體膜電位受損的細(xì)胞(膜電位較低)中，染料主要以綠色熒光單體存在于整個(gè)細(xì)胞質(zhì)中，在線粒體中不再表現(xiàn)出橙色熒光。
線粒體膜電位檢測試劑盒特點(diǎn)：
1、比JC-1熒光染料靈敏10倍，水溶性好;
2、耐光雙發(fā)射染料;
3、無需漂洗/換液過程;
4、單獨(dú)的MITO-lD測定可用于檢測線粒體質(zhì)量;
5、在較低的藥物/劑量濃度下檢測細(xì)胞毒性;
6、沒有像JC-1配方那樣的溶劑偽影。
線粒體膜電位檢測試劑盒作用機(jī)制：
該染料的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)由高度共軛的部分組成，使正電荷廣泛離域，從而允許電泳吸收到J化的線粒體內(nèi)膜的帶負(fù)電荷的基質(zhì)相。該染料能夠選擇性地進(jìn)入線粒體，當(dāng)膜電位增加時(shí)，它的顏色會從綠色可逆地變?yōu)槌壬?雙發(fā)射電位探針)。這種光物理特性是由于在膜J化時(shí)可逆地形成J-聚集體，導(dǎo)致在490nm處激發(fā)時(shí)，發(fā)射光從～530nm(單體染料的發(fā)射)轉(zhuǎn)移到590nm(J-聚集體形式的發(fā)射)。因此，具有低膜電位的線粒體將積累低濃度的染料，并表現(xiàn)出綠色熒光，而更高J化的線粒體將表現(xiàn)出橙色的熒光。
