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產(chǎn)品名稱：D2810 DNA退火緩沖液

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產(chǎn)品特點：D2810 DNA退火緩沖液
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-20℃保存，一年有效。

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D2810 DNA退火緩沖液的詳細資料：

D2810 DNA退火緩沖液

把要退火的DNA oligo用經(jīng)滅菌的三蒸水配制成50μM。解凍Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)，混勻備用。如經(jīng)常使用，本Buffer可放置2-8℃一個月。
2. 如下設(shè)置退火反應(yīng)體系：

Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)	20μl
DNA oligo A(50μM)	20μl
DNA oligo B(50μM)	20μl
Nuclease-Free Water	40μl
總體積	100μl

按照上述順序依次加入各種試劑，混勻。放入PCR儀。
3. 如下設(shè)置PCR儀進行退火反應(yīng)：

步驟	溫度	時間	說明
1	95℃	2分鐘	讓oligo充分變性
2	每8秒下降0.1℃，降25℃(注1)	約90分鐘	退火
3	4℃	長時間保持	暫時存放

注1：如果所用的PCR儀不具備下降0.1℃的功能，也可以設(shè)置為每90秒下降1℃。
4. 退火結(jié)束后可以直接用于連接反應(yīng)，也可以在-20℃凍存?zhèn)溆?。如果退火結(jié)束后打算進行酶切等其它反應(yīng)，好用純化試劑盒進行純化，或者確保退火產(chǎn)物在反應(yīng)體系中體積不超過10%，以避免AnnealingBuffer對后續(xù)的酶反應(yīng)體系的干擾。

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