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免疫組化 DAB顯色試劑盒
貨號(hào)：DA1010
規(guī)格：3ml 10ml
保存：
-20℃避光密閉保存，一年有效。避免反復(fù)凍融。短期可 2-8℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過(guò)氧化物酶（POD）的底物，DAB 顯色液主要用于免疫過(guò)氧化物酶法，適用于辣根過(guò)氧化物酶 HRP 標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過(guò)氧化物酶使底物發(fā)生反應(yīng)，于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物。免疫印記可直接在膜上顯示條帶。免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫 5-20 分鐘，隨后在顯微鏡下觀察顯色qing況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固。其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察，也可經(jīng) OsO4 處理后，增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度，用于電鏡觀察。
操作說(shuō)明：
1. 對(duì)于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜，在與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體或其它形式的探針?lè)跤?，用適當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次，每次 3-5 分鐘。
2. 取 900ul PBS（或雙蒸水） ，加入 50ul 溶液 A，50ul 溶液 B 混合均勻，即配成 DAB 工作液。如需要更大體積工作液，可按比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光保存，1 小時(shí)內(nèi)使用，過(guò)期后請(qǐng)將剩余的液體廢棄。
3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液，確保能充分覆蓋樣品。
4. 室溫避光孵育 3-10 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，避免光照，直顯色預(yù)期深淺。
5. 去除 DAB 染色工作液，用蒸餾水洗滌 2-3 次即可終止顯色反應(yīng)。
6. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品，顯色反應(yīng)終止后，可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜，顯色反應(yīng)終止后，可以室溫晾干避光保存。
注意事項(xiàng)：
1．DAB 溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出，應(yīng)確保結(jié)晶*溶解再行使用；
2．顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，新鮮配制的工作液應(yīng)為無(wú)色或淺棕色，如顏色過(guò)深，請(qǐng)勿使用；
3．顯色時(shí)間嚴(yán)格控制，根據(jù)情況調(diào)整，以免顯色過(guò)度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色，不能*存在；
4．DAB 為可疑致癌物，請(qǐng)采取必要的防范措施。操作時(shí)應(yīng)戴手套，盡量避免與皮膚接觸，用后及時(shí)*沖洗，接觸 DAB 的實(shí)驗(yàn)用品好經(jīng)洗液浸泡 24h 后使用。
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